实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞中BMI-1 mRNA的表达及其意义

目的：建立SYBR GreenI实时定量RT—PCR方法检测白血病细胞中BMI-1mRNA的表达并探讨其临床意义。方法：在TRIzol提取总RNA后，将mRNA逆转录成cDNA，再用SYBRGreenI实时定量PCR方法检测BMI—1 mRNA在白血病细胞系（K562、HL-60、Daudi、Jurkat、Molt-4、U937和THP-1）、56例AML初治患者的骨髓ACDA抗凝标本和30例健康体检者的外周血EDTA抗凝标本以及6例细胞形态学正常的骨髓ACDA抗凝标本中的表达，扩增产物的特异性通过熔解曲线和凝胶电泳双重确认，以ABL为内参照，采用2^-ΔΔct法计算其相对表达量。结果：①BMI-1 mRNA在白血病细胞系（K562、HL-60、Daudi、Jurkat、Molt-4、U937和THP-1）均存在表达，其中U937表达最高，而HL-60表达最低。②与对照组相比，BMI-1 mRNA在白血病细胞中的表达显著升高（P〈0．01）。结论：①SYBRGreenI实时RT-PCR是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测BMI-1mRNA的方法。②BMI-1参与白血病的发生，可能是一种新的肿瘤分子标记物。