| 基于软骨细胞分离培养的骨痹体外细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 王欢,唐学章,舒骏,陈玮,王洋,丁海涛,齐蕊涵,杨帆,陈剑,史榕荇.基于软骨细胞分离培养的骨痹体外细胞模型的建立[J].中国中医基础医学杂志,2023(3):401-405. |
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| 作者姓名： | 王欢 唐学章 舒骏 陈玮 王洋 丁海涛 齐蕊涵 杨帆 陈剑 史榕荇 |
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| 作者单位： | 1. 中日友好医院;2. 北京中医药大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年项目(81804214)-推拿通过含miR-146a的胞外囊泡调控固有免疫应答维护骨关节炎关节稳态的机制研究；;北京市优秀人才培养资助项目(2018000052580G469)-基于lncRNA/miRNA/circRNA调控网络构建探讨推拿维护骨关节炎固有免疫平衡的表观修饰机制； |
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| 摘 要： | 目的 建立骨痹体外软骨细胞炎症模型,为研究骨关节炎(osteoarthritis,OA)的中医药治疗机制提供细胞学基础。方法 采用胶原酶法进行人软骨细胞的分离培养,观察其形态学,Ⅱ型胶原(collagenⅡ,COLⅡ)免疫荧光染色法鉴定软骨细胞,细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)检测各浓度梯度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对软骨细胞生长活性的影响,选择浓度分别为500、100、20、10、2 ng·m L-1的LPS经0、4、6、12、24 h诱导软骨细胞后,Elisa法检测各组细胞上清液中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)的含量,筛选最佳干预浓度及时间。结果 分离培养的细胞光镜下观察符合软骨细胞形态学,COLⅡ免疫荧光染色呈阳性,具备软骨细胞特征。与对照组比较,加入差异浓度LPS的各实验组软骨细胞存活率(survival rate,SR)随LPS浓度升高呈逐渐下降趋势,而抑制率(inhibition ...
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| 关 键 词： | 骨痹 软骨细胞 分离培养 体外 炎症模型 |
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