| 腺病毒介导的心肌营养素1基因修饰大鼠神经干细胞 |
| |
| 引用本文： | 杨云华,廖维宏,张正丰,李栋平,李红运.腺病毒介导的心肌营养素1基因修饰大鼠神经干细胞[J].中国组织工程研究与临床康复,2005,9(42):9-11. |
| |
| 作者姓名： | 杨云华 廖维宏 张正丰 李栋平 李红运 |
| |
| 作者单位： | 1. 解放军成都军区昆明总医院神经外科,云南省昆明市,650032
2. 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室,重庆市400042 |
| |
| 摘 要： | 目的:以心肌营养素1基因修饰大鼠神经干细胞,为心肌营养素1基因修饰的神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤提供物质基础。方法:实验于2002-06/2003-06在第三军医大学野战外科研究所全军重点开放实验室进行。从W istar大鼠胚胎海马和室管膜区组织分离、培养大鼠胚胎神经干细胞,以构建纯化好的重组腺病毒-心肌营养素1和重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白载体转染神经干细胞。相差显微镜下直接观察细胞生长存活情况,应用免疫细胞化学和免疫荧光技术检测神经干细胞及其诱导后分化细胞的特异性蛋白巢蛋白、神经微丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白,外源性Brdu和增强绿色荧光蛋白的掺入情况,并观察心肌营养素1基因在神经干细胞中的表达。结果:①从胚胎大鼠分离的神经干细胞可在体外多次传代,经细胞增殖标记物Brdu掺入实验证明神经干细胞具有分裂增殖能力。②检测神经干细胞标志物巢蛋白、神经元标志物神经微丝蛋白和胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白,证实神经干细胞具有多向分化潜能。③重组腺病毒-心肌营养素1及重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白转染神经干细胞后应用免疫组化和荧光示踪技术,检测到神经干细胞中心肌营养素1和报告基因增强绿色荧光蛋白表达明显持续增加。结论:①实验成功地分离和培养出大鼠神经干细胞,并在体外可多次传代增殖并可诱导分化为神经元和胶质细胞。②重组腺病毒-心肌营养素1和重组腺病毒-增强绿色荧光蛋白转染神经干细胞后,外源性心肌营养素1基因和增强绿色荧光蛋白在细胞中可持续稳定表达。
|
| 关 键 词： | 干细胞移植 神经系统疾病 细胞培养 动物 基因修饰 |
| 文章编号： | 1671-5926(2005)42-0009-03 |
| 修稿时间： | 2005年5月30日 |
Adenovirus-mediated cardiotrophin-1 gene for modifying neural stem cells in rats |
| |
| Yang Yun-hua,Liao Wei-hong,Zhang Zheng-feng,Li Dong-ping,Li Hong-yun.Adenovirus-mediated cardiotrophin-1 gene for modifying neural stem cells in rats[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2005,9(42):9-11. |
| |
| Authors: | Yang Yun-hua Liao Wei-hong Zhang Zheng-feng Li Dong-ping Li Hong-yun |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
