| 空肠弯曲菌Pen:19 peblA基因序列分析及其真核表达重组质粒的构建 |
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| 引用本文： | 郑惠,蔡方成,邓兵,钟敏.空肠弯曲菌Pen:19 peblA基因序列分析及其真核表达重组质粒的构建[J].第三军医大学学报,2006,28(7):644-647. |
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| 作者姓名： | 郑惠 蔡方成 邓兵 钟敏 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学儿童医院神经内科,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院神经内科,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院神经内科,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院神经内科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的针对空肠弯曲菌基因组序列为一超变量序列,测序比较空肠弯曲菌Pen:2和Pen:19 peblA基因的同源性,以证实peblA基因的保守性.在此基础上,构建空肠弯曲菌Pen:19 peblA基因真核表达重组质粒.方法以含有Kpn Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点的同一对引物行PCR反应,获得空肠弯曲菌Pen:2、Pen:8、Pen:19和Pen:21peblA基因DNA片段,测序比较Pen:2和Pen:19 peblA基因的同源性.并选择与格林-巴利综合征最为相关的空肠弯曲菌Pen:19 peblA基因PCR产物为目的片段,插入到真核表达载体pcDNA3.1( ),以构建重组质粒.重组质粒经双酶切鉴定、PCR鉴定和测序确认后转染至COS-7细胞,RT-PCR方法检测其瞬时表达.对阳性克隆培养基上清中PEB1蛋白的表达用ELISA分析.结果测序证实空肠弯曲菌Pen:19 peblA基因序列与Pen:2 peblA基因序列一致.采用RT-PCR方法能够从重组质粒转染的COS-7细胞中扩增出与目的基因大小一致的DNA片段.ELISA分析表明PEB1蛋白在COS-7细胞上清中获得表达.结论空肠弯曲菌peblA基因具有良好保守性,以此成功构建的重组质粒能在COS-7细胞中表达,为空肠弯曲菌DNA疫苗的研究奠定了良好的基础.
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| 关 键 词： | 空肠弯曲菌 peblA基因 重组质粒 DNA疫苗 |
| 文章编号： | 1000-5404(2006)07-0644-04 |
| 修稿时间： | 2005年9月19日 |
Analysis of peblA gene sequence and construction of eukaryotic expression recombinant plasmid of peblA gene of Campylobacter jejuni Pen: 19 |
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| ZHENG Hui,CAI Fang-cheng,DENG Bing,ZHONG Min.Analysis of peblA gene sequence and construction of eukaryotic expression recombinant plasmid of peblA gene of Campylobacter jejuni Pen: 19[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2006,28(7):644-647. |
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| Authors: | ZHENG Hui CAI Fang-cheng DENG Bing ZHONG Min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Campylobacter jejuni peblA gene recombinant plasmid DNA vaccine |
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