| 凝血酶诱发人支气管上皮细胞恶性转化 |
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| 引用本文： | 曹守冬,肖伟,朱茂祥,杨陟华,薛玉文. 凝血酶诱发人支气管上皮细胞恶性转化[J]. 中国药理学与毒理学杂志, 2006, 20(1): 53-59 |
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| 作者姓名： | 曹守冬 肖伟 朱茂祥 杨陟华 薛玉文 |
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| 作者单位： | 1. 山东大学齐鲁医院呼吸内科,山东,济南,250012
2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的探讨凝血酶对人类支气管上皮细胞的致癌性和转化涉及的相关机制。方法用75nmo·lL-1凝血酶持续刺激人类乳头状瘤-18永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D)70d,观察不同代龄细胞的血清抗性、软琼脂克隆形成率,流式细胞术观察细胞周期改变,逆转录-聚合酶链反应检测凝血酶受体-蛋白酶活化受体(PAR1),c-myc和p21~(cip1)基因表达水平,蛋白质免疫印迹检测C-MYC和P21~(cip1)蛋白表达变化,鉴定细胞的恶性转化表型。结果经传代培养,凝血酶处理的第10代BEP2D细胞血清抗性增强,接种效率提高,第20代细胞呈非贴壁依赖性生长,软琼脂克隆形成率升高达(0.461±0.009)%。流式细胞术结果显示,第22代细胞处于S期比例为55.63%。凝血酶转化第25代、第27代细胞PAR1基因、c-myc基因及C-MYC蛋白表达水平上调。相反,p21~(cip1)基因和P21~(cip1)蛋白表达减弱。凝血酶处理的第20代细胞已具有较为稳定的转化表型和细胞生物学特性,可能是具有裸小鼠致瘤型的恶性转化细胞。每升2×104抗凝血酶单位水蛭素能够拮抗凝血酶对BEP2D细胞的恶性转化作用。结论凝血酶对人支气管上皮细胞具有恶性转化作用,c-myc基因转录和蛋白表达活化与p21~(cip1)失活在这一过程中发挥关键作用。
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| 关 键 词： | 凝血酶 蛋白酶活化受体-1 人支气管上皮细胞 恶性转化 基因表达 基因 c-myc 基因 p21~(cip1) 蛋白表达 |
| 收稿时间： | 2005-09-26 |
| 修稿时间： | 2005-12-12 |
Malignant transformation of immortalized human bronchial epithelial cells with thrombin |
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| CAO Shou-Dong,XIAO Wei,ZHU Mao-Xiang,YANG Zhi-Hua,XUE Yu-Wen. Malignant transformation of immortalized human bronchial epithelial cells with thrombin[J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2006, 20(1): 53-59 |
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| Authors: | CAO Shou-Dong XIAO Wei ZHU Mao-Xiang YANG Zhi-Hua XUE Yu-Wen |
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| Affiliation: | (1. Department of Respiratory Medicine, Qilu Hospital, Shandong University, Jinan 250012, China; 2. Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | thrombin protease activated receptor 1 human bronchial epithelial cells malignant transformation gene expression gene c-myc gene p21~ cip1 protein expression |
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