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结核杆菌抗原多表位融合蛋白的重组表达与鉴定
引用本文:吴传勇,娄加陶,蒋廷旺,钱琤,周晔,陈燕,谷明莉,邓安梅,仲人前.结核杆菌抗原多表位融合蛋白的重组表达与鉴定[J].第二军医大学学报,2006,27(12):1281-1285.
作者姓名:吴传勇  娄加陶  蒋廷旺  钱琤  周晔  陈燕  谷明莉  邓安梅  仲人前
作者单位:第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003;第二军医大学长征医院实验诊断科,解放军临床免疫中心,上海,200003
基金项目:国家自然科学基金,上海市重点基础科研项目,上海市科研项目,上海市青年科技启明星计划
摘    要:目的:构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA-A*0201限制性CD8 CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达.方法:选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A*0201限制性CD8 CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR序列作为接头,合成全基因序列,经 PCR扩增后插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹鉴定重组表达蛋白.结果:成功构建了结核杆菌多表位蛋白的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为40 000的融合蛋白.结论:多表位融合蛋白的重组表达为进一步开发新型结核疫苗打下了基础.

关 键 词:分枝杆菌  结核  表位  疫苗  合成
文章编号:0258-879X(2006)12-1281-05
收稿时间:2006-10-23
修稿时间:2006-11-23
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