| 结核分枝杆菌ESAT-6基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 金磊,吴洁敏,倪培华. 结核分枝杆菌ESAT-6基因的克隆与表达[J]. 检验医学, 2004, 19(4): 349-351 |
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| 作者姓名： | 金磊 吴洁敏 倪培华 |
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| 作者单位： | 上海中医药大学附属曙光医院检验科,上海,200021;上海第二医科大学附属瑞金临床医学院检验系,上海,200025 |
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| 摘 要： | 目的 对结核分枝杆菌的ESAT-6基因进行克隆、鉴定与表达，为结核病的诊断、重组疫苗的应用打下基础。方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板，用聚合酶链反应(PCR)对ESAT-6基因进行扩增，将扩增的产物连接于测序载体pGEM-T上，经测序反应确定无误后，再将PCR产物与原核表达载体pET42b( )构建表达ESAT-6的重组质粒，将重组质粒先转化人大肠杆菌DH5a内并提取质粒，经酶切鉴定后，再转化入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内，对转化菌株进行诱导后，破菌，进行SDS-PAGE电泳。结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白，其表达的蛋白质相对分子质量为9900。结论 目的基因克隆到菌株内，重组结核分枝杆菌ESAT-6的成功表达为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测等奠定了基础。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 原核表达载体 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1001-2087(2004)04-0349-03 |
| 修稿时间： | 2004-02-05 |
The cloning and expression of ESAT-6 gene from Mycobacterium tuberculosis |
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