| 肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定 |
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| 引用本文： | 侯瑞,饶贤才,陈志瑾,杨杰,胡晓梅,丛延广,谭银玲,胡福泉.肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定[J].免疫学杂志,2007,23(3):277-282. |
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| 作者姓名： | 侯瑞 饶贤才 陈志瑾 杨杰 胡晓梅 丛延广 谭银玲 胡福泉 |
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| 作者单位： | 第三军医大学微生物学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 军队攻关项目
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重庆市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建表达人源肽抗生素hPAB-β的重组毕赤酵母,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法 用PCR及引物延伸法得到天然及优化的hPAB-β序列,克隆入pPIC9K质粒,转化DH5α大肠埃希菌,用酶切和核苷酸测序鉴定.重组质粒经SalⅠ酶线性化,整合入毕赤酵母GS115中,在DNA,mRNA及蛋白水平鉴定阳性重组子.结果 构建的含天然及优化序列的重组质粒酶切均可得到相应大小的插入片段,与预期相符,测序结果表明序列和阅读框均正确.线性化的重组质粒转入GS115后,得到7个不同的高拷贝阳性转化子,均能表达重组肽并具有良好的抑菌活性.结论 本研究成功构建含天然及优化hPAB-β序列的重组毕赤酵母工程菌,能够用于肽抗生素hPAB-β的制备.
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| 关 键 词： | 肽抗生素hPAB-β 毕赤酵母 表达 鉴定 肽抗生素 毕赤酵母 表达 活性鉴定 peptide antibiotics human Expression analysis biological activity 酵母工程菌 研究 抑菌活性 转化子 高拷贝 阅读框 测序鉴定 预期 插入片段 大小 重组质粒 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）03-0277-06 |
| 收稿时间： | 2006-11-13 |
| 修稿时间： | 2007-01-29 |
Expression of human peptide antibiotics hPAB-β in Pichia pastoris and its biological activity analysis |
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| HOU Rui,RAO Xian-cai,CHEN Zhi-jin,YANG Jie,HU Xiao-mei,CONG Yang-guang,TAN Yin-ling,HU Fu-quan.Expression of human peptide antibiotics hPAB-β in Pichia pastoris and its biological activity analysis[J].Immunological Journal,2007,23(3):277-282. |
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| Authors: | HOU Rui RAO Xian-cai CHEN Zhi-jin YANG Jie HU Xiao-mei CONG Yang-guang TAN Yin-ling HU Fu-quan |
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| Institution: | Department of Microbiology, Third Military Medical University, Chongqing, 400038, China |
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