| 竞争性PCR内参照菌的构建及应用 |
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| 引用本文： | 杜迪军,缪竞智,张秀珍. 竞争性PCR内参照菌的构建及应用[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2000, 20(5): 442-446 |
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| 作者姓名： | 杜迪军 缪竞智 张秀珍 |
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| 作者单位： | 卫生部北京医院呼吸内科 |
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| 摘 要： | 目的 建立一种构建竞争性PCR内参照菌的方法 ,并初步应用于铜绿假单胞菌 (Pseu domonasaeruginosa ,简称PA)的竞争性PCR定量检测。方法 通过整合载体pSX1 2和pUC19 attP tetr 将竞争模板插入大肠杆菌JM83染色体中 ,构建内参照菌JM83/16SN。以JM83/16SN作为内参照 ,建立PA竞争性PCR定量和半定量检测方法。结果 细菌质粒限制性酶切分析、药敏试验及染色体DNA指纹图谱分析证实竞争模板已插入到JM83/16SN染色体中。在竞争性PCR定量法中 ,得出定量回归方程y = 1 99x 14 0 5 (r= 0 97)。将 10倍系列稀释的PA标本作竞争性PCR半定量检测及定量培养 ,其结果存在良好的一致性。结论 通过整合载体可以将竞争模板插入大肠杆菌染色体中来构建内参照菌株。竞争性PCR半定量法可以简便、准确地测定标本中PA浓度范围
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| 关 键 词： | 整合载体 DNA指纹图谱 铜绿假单胞菌 聚合酶链反应 |
Construction and application of E. coli strains used as internal control for competitive PCR |
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| DU Dijun,MIAO Jingzhi,ZHANG Xiuzhen. Construction and application of E. coli strains used as internal control for competitive PCR[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2000, 20(5): 442-446 |
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| Authors: | DU Dijun MIAO Jingzhi ZHANG Xiuzhen |
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| Affiliation: | DU Dijun,MIAO Jingzhi,ZHANG Xiuzhen. Department of Respiratory Medicine,Beijing Hospital,Ministry of Public Health,Beijing 100730 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Quantitative PCR Genetic vectors DNA fingerprinting Pseudomonas aeruginosa |
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