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大鼠胰腺导管上皮细胞体外分离与定向分化
引用本文:刘涛,勾善淼,吴河水,熊炯炘,周峰,万赤丹,王春友. 大鼠胰腺导管上皮细胞体外分离与定向分化[J]. 中华器官移植杂志, 2007, 28(8): 496-499
作者姓名:刘涛  勾善淼  吴河水  熊炯炘  周峰  万赤丹  王春友
作者单位:430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科
基金项目:国家自然科学基金(30170911)
摘    要:目的分离和纯化大鼠的胰腺导管上皮细胞,在体外培养并诱导其向胰岛细胞定向分化。方法采用胶原酶逆行灌注法消化、密度梯度离心结合不同细胞贴壁差异性分离和纯化胰腺导管上皮细胞;以角蛋白-19(CK-19)免疫细胞化学染色进行鉴定;用RMPI1640+含体积分数为10%的胎牛血清(FBS)培养基培养促进胰导管上皮细胞增殖,1周后,更换无血清培养基DMEM/F12并加入角朊细胞生长因子等进一步促进其增殖,细胞达80%汇合时传代,加入高糖及尼克酰胺促进胰导管上皮细胞向胰岛细胞定向分化;对胰岛样结构行双硫腙染色。结果CK-19染色结果证实所获细胞绝大多为导管上皮细胞。体外培养中导管上皮细胞24h开始贴壁,14-21d达80%融合并形成细胞克隆,第28d胰岛细胞样结构形成,且被双硫腙染成猩红色。结论采用密度梯度离心结合差异贴壁法可获得纯化的大鼠胰腺导管上皮细胞,在体外培养与诱导分化条件下可生成胰岛样结构。

关 键 词:大鼠 胰腺 上皮细胞 细胞分化 胰岛
修稿时间:2006-11-21

Isolation and differentiation of pancreatic ductal epithelial cells of rats in vitro
LIU Tao, GOU Shanmiao, WU He-shui ,et al.. Isolation and differentiation of pancreatic ductal epithelial cells of rats in vitro[J]. Chinese Journal of Organ Transplantation, 2007, 28(8): 496-499
Authors:LIU Tao   GOU Shanmiao   WU He-shui   et al.
Affiliation:Department of Pancreatic Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China
Abstract:
Keywords:Rats   Pancreas   Epithelial Cells   Cell Differentiation   Islets
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