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| 骨髓间充质干细胞-胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统的构建及效应 | |
| 引用本文： | 曹始波,孟庆海,金澎,王洪伟,栗世方,窦以河,孟承东,阎晶杰.骨髓间充质干细胞-胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统的构建及效应[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(27). |
| 作者姓名： | 曹始波 孟庆海 金澎 王洪伟 栗世方 窦以河 孟承东 阎晶杰 |
| 作者单位： | 1. 青岛大学医学院附属医院,神经外科,山东省青岛市,266003 2. 青岛大学医学院附属医院,放射科,山东省青岛市,266003 3. 临邑县德平医院,山东省临邑县,251500 |
| 基金项目： | 山东省自然科学基金重点项目 |
| 摘 要： | 背景:体内研究已经证实骨髓间充质干细胞能够像神经干细胞一样在脑内迁移和整合,如果骨髓间充质干细胞用于系统途径移植成为可能,将会显著简化移植的步骤.目的:构建含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因的重组表达质粒pEGFP-N3-CD,用脂质体Lipofectamine2000转染大鼠骨髓间充质千细胞,体外观察CD基因的表达及BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞的杀伤作用.方法:构建pEGFP-N3-CD质粒,酶切、DNA测序鉴定.全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,脂质体Lipofectamine2000介导重组表达质粒pEGFP-N3-CD转染大鼠骨髓间充质干细胞,G418筛选培养获取阳性克隆(BMSCs-CD细胞),免疫细胞化学染色检测BMSCs-CD细胞的CD基因蛋白表达.Transwell小室共培养BMSCs-CD细胞和C6胶质瘤细胞,24 h后加入前体药物5-氟胞嘧啶,72 h后TUNEL、MTT、流式细胞术检测C6胶质瘤细胞的凋亡情况.结果与结论:构建的重组表达质粒pEGFP-N3-CD含完整的CD基因序列,CD基因转染至骨髓间充质干细胞并在基因及蛋白水平有完整表达.BMSCs-CD和C6胶质瘤细胞体外共培养条件下,C6胶质瘤的凋亡率呈剂量依赖性,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.01).结果提示体外共培养条件下,BMSCs-CD/5-氟胞嘧啶自杀基因治疗系统对C6胶质瘤细胞生长有显著的抑制作用. |
| 关 键 词： | 胞嘧啶脱氨酶 转染 骨髓间充质干细胞 transwell共培养 胶质瘤 基因疗法 |
Construction and effects of bone marrow mesenchymal stem cells-cytosine deaminase/5-fluorocytosine suicide gene therapy system |
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| Cao Shi-bo,Meng Qing-hai,Jin Peng,Wang Hong-wei,Li Shi-fang,Dou Yi-he,Meng Cheng-dong,Yan Jing-jie.Construction and effects of bone marrow mesenchymal stem cells-cytosine deaminase/5-fluorocytosine suicide gene therapy system[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(27). | |
| Authors: | Cao Shi-bo Meng Qing-hai Jin Peng Wang Hong-wei Li Shi-fang Dou Yi-he Meng Cheng-dong Yan Jing-jie |
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