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| KAI1基因对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制 | |
| 引用本文： | 杨建民,司遂海,彭志红,叶再元,费保莹.KAI1基因对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制[J].浙江医学,2005,27(12):891-895. |
| 作者姓名： | 杨建民 司遂海 彭志红 叶再元 费保莹 |
| 作者单位： | 1. 310014,杭州,浙江省人民医院消化内科 2. 山东省济宁医学院附属医院消化内科 3. 重庆市第三军医大学西南医院全军消化专科中心 4. 310014,杭州,浙江省人民医院胃肠病学重点实验室 |
| 摘 要： | 目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制,为肝癌的基因治疗提供理论和实验依据.方法用亚克隆技术构建KAI1基因正、反义真核表达质粒,DOTAP脂质体法将其分别转入高转移潜能的人MHCC97-H肝癌细胞,以限制性酶切、PCR、Western blot及免疫组化鉴定基因重组及转染是否成功.电镜观察细胞超微形态变化,流式细胞仪检测细胞周期分布,细胞生长曲线和平板法集落形成试验观察细胞生长和集落形成能力,Boyden Chamber试验观察细胞侵袭能力,微管吸吮技术测定细胞的粘弹性和粘附力.BALB/CA 4～6周龄雄性裸鼠80只,随机分正义组、反义组、亲本细胞组及空载体组进行皮下(n=40)和原位肝(n=40)种植试验,观察体内的成瘤性、侵袭性及远处转移能力,免疫组化研究癌转移灶AFP和肿瘤组织细胞外基质(ECM)及粘附分子的表达状况.结果(1)成功构建了KAI1正、反义基因真核表达质粒,并将其分别转入MHCC97-H人肝癌细胞;(2)发现转入KAI1基因后可导致肝癌MHCC97-H细胞的一些细胞器数量和形态的变化;(3)KAI1基因对肝癌MHCC97-H细胞的体内外生长、细胞周期及体内成瘤性无明显影响;(4)反义KAI1基因可使MHCC97-H细胞的克隆形成能力增强、对体内外肝癌细胞的侵袭和转移有促进作用;(5)KAI1基因表达上调能使MHCC97-H细胞的体内外侵袭能力降低;(6)KAI1基因抑制肝癌侵袭和转移的机制可能与细胞粘弹性增加、ECM表达上调、粘附分子表达下调及粘附力下降等变化有关.结论KAI1基因在肝癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,上调KAI1基因表达能明显降低肝癌细胞的侵袭和转移能力. |
| 关 键 词： | 肿瘤转移抑制基因 肝细胞癌 肿瘤转移 KAI1基因 基因转染 |
| 收稿时间： | 2005-06-20 |
| 修稿时间： | 2005年6月20日 |
The effect of KAI1 gene on invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cells and its molecular mechanism |
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| YANG Jianmin, SI Suihai, PENG Zhihong,et al..The effect of KAI1 gene on invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cells and its molecular mechanism[J].Zhejiang Medical Journal,2005,27(12):891-895. | |
| Authors: | YANG Jianmin SI Suihai PENG Zhihong |
| Institution: | YANG Jianmin, SI Suihai, PENG Zhihong, et al. |
| Abstract: | |
| Keywords: | Metastasis-suppressor gene Hepalneellular carcinoma Tumor metastasis KAII gene Gene transfection |
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