| HBV全基因真核表达载体的构建及表达 |
| |
| 引用本文： | 高立芬,孙汶生,马春红,刘素侠,梁晓红,陈有海.HBV全基因真核表达载体的构建及表达[J].山东大学学报(医学版),2003,41(4):351-354. |
| |
| 作者姓名： | 高立芬 孙汶生 马春红 刘素侠 梁晓红 陈有海 |
| |
| 作者单位： | 山东大学医学院免疫学研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金委海外青年学者合作研究基金资助项目(30128023)，国家自然科学基金资助项目(30070341) |
| |
| 摘 要： | 目的：为诱导HBV特异性CTL，构建HBV全基因真核表达载体，并对其在细胞中的表达进行了初步研究。方法：以EcoRⅠ酶切pBR322-2HBV和pcDNA3，回收完整的HBV基因片段及线性化的载体pcDNA3，T4 DNA连接酶连接HBV和pcDNA3，转化、筛选，酶切鉴定HBV的插入方向。以脂质体将构建的pcDNA3-HBV转染HepG2肝癌细胞，经G418筛选，ELISA检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg的表达，RT-PCR检测转染细胞中PreSl mRNA的表达。结果：经酶切鉴定获得正向插入的pcDNA3-HBV，转染HepG2后，建立了新的肝癌细胞系HepG2．02G，细胞培养上清中可检测到高水平的HBsAg，PreSl mRNA在转染细胞中表达。结论：经体外重组，获得携带全长HBV基因片段的pcDNA3-HBV表达载体，并可在肝癌细胞中稳定表达。
|
| 关 键 词： | 肝炎病毒 乙型 表达载体 真核细胞 |
| 文章编号： | 1671-7554(2003)04-0351-04 |
| 修稿时间： | 2003年3月13日 |
Construction and expression of HBV gene eukaryotic cell expression vector |
| |
| GAO Li-fen,SUN Wen-sheng,MA Chun-hong,et al.Construction and expression of HBV gene eukaryotic cell expression vector[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2003,41(4):351-354. |
| |
| Authors: | GAO Li-fen SUN Wen-sheng MA Chun-hong |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Hepatitis B virus Expression vector Eukaryotic cell |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
