重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅰ) |
| |
引用本文: | 凌明圣,李殿俊,许祥裕,刘旭,施凤霞,丁树标,朱有华.重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅰ)[J].实用肿瘤学杂志,1997(4). |
| |
作者姓名: | 凌明圣 李殿俊 许祥裕 刘旭 施凤霞 丁树标 朱有华 |
| |
作者单位: | 南京军事医学研究所
(凌明圣,许祥裕,施凤霞,丁树标),哈尔滨医科大学肿瘤研究所
(李殿俊,刘旭),南京军事医学研究所(朱有华) |
| |
摘 要: | 目的 在成功构建人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)高效表达克隆的基础上,对表达产物进行实验室规模和中试规模的分离、纯化及对rhGM—CSF在溶液中的稳定性进行研究。方法 应用工程菌发酵、超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层折、复性、离子交换等方法对rhGM—CSF进行纯化,并用GM—CSF依赖株TF-1细胞MTT法测定其生物学活性及应 用透析法测定其在溶液中的稳定性。结果 终产物纯度达99%,比活性达1.5×10~7u/mg蛋白。在偏硷性溶液中会发生降解,但降解后生物活性未见明显下降。结论 采用分子筛色谱和阴离子交换色谱对GM—CSF进行纯化,经从实验室规模放大至中试规模证明该工艺是简便可行的,得到了高纯度、高比活性的纯品。
|
关 键 词: | 粒/巨噬细胞集落刺激因子 纯化 发酵 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|