| pEGFP-N1-BMP2真核表达载体的构建及其经超声微泡介导转染HPDLFs后的表达 |
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| 引用本文： | 仲琳,钟晓波,张云燕,骆书美,Nameeta Shrestha,齐进,李春光.pEGFP-N1-BMP2真核表达载体的构建及其经超声微泡介导转染HPDLFs后的表达[J].重庆医学,2010,39(9). |
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| 作者姓名： | 仲琳 钟晓波 张云燕 骆书美 Nameeta Shrestha 齐进 李春光 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016;重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,400016 |
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| 摘 要： | 目的 构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,并检测其经超声微泡转基因技术转染人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)后的瞬时表达情况.方法 从人胎盘滋养层细胞系中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得目的 基因人骨形成蛋白-2(hBMP2)基因片段,连接pMD19-T载体并测序正确后与真核荧光表达载体pEGFP-N1连接,酶切鉴定后利用超声微泡转基因技术转染入HPDLFs中,通过荧光显微镜和RT-PCR检测目的 基因在HPDLFs中的表达.结果 成功克隆人BMP2基因,重组质粒pEGFP-N1-BMP2经PCR及双酶切鉴定均证实hBMP2基因已与pEGFP-N1正确重组.pEGFP-N1-BMP2经超声微泡转染HPDLFs后,通过绿色荧光观察和RT-PCR检测证实hBMP2能够在体外培养的HPDLFs内有效的转录和瞬时表达.结论 成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达载体,通过超声微泡转基因技术成功转染入HPDLFs并得到有效表达,为进一步研究该质粒与超声微泡转基因技术在牙周再生基因治疗中的应用提供实验基础.
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| 关 键 词： | 牙周再生 超声微泡 人骨形成蛋白-2 增强型绿色荧光蛋白 基因转染 人牙周膜成纤维细胞 |
Construction of eukaryotic expression vector pEGFP-N1-BMP2 and its expression in human periodontal ligament fibroblast cells transfected via ultrasound -mediated microbubble destruction |
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| Nameeta Shrestha.Construction of eukaryotic expression vector pEGFP-N1-BMP2 and its expression in human periodontal ligament fibroblast cells transfected via ultrasound -mediated microbubble destruction[J].Chongqing Medical Journal,2010,39(9). |
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| Authors: | Nameeta Shrestha |
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