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| hVEGF165基因克隆及其在COS-7细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 葛建军,周正春,陈兵,张胜权,罗欣,徐从贞,汪思应.hVEGF165基因克隆及其在COS-7细胞中的表达[J].中国胸心血管外科临床杂志,2005,12(3):185-188. |
| 作者姓名： | 葛建军 周正春 陈兵 张胜权 罗欣 徐从贞 汪思应 |
| 作者单位： | 1. 安徽医科大学第一附属医院,心血管外科,合肥,230022 2. 安徽医科大学生物化学分子生物学教研室,合肥,230022 3. 安徽医科大学,病理生理学教研室,合肥,230022 |
| 基金项目： | 安徽省自然科学基金资助项目(03043707)~~ |
| 摘 要： | 目的克隆人血管内皮生长因子(hVEGF)基因VEGF165片段,构建pcDNA3.1/hVEGF165,观察其在COS-7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病的研究奠定基础。方法从合法引产的胎儿心肌组织中提取总核糖核酸(RNA),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,聚合酶链反应(PCR)法鉴定并测序,双酶切后克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his-B中,构建pcDNA3.1/hVEGF165重组体。用脂质体介导将其转染COS-7细胞,蛋白印迹(Westernblotting)法检测rhVEGF165的表达蛋白。结果用RT-PCR方法从胎儿心肌组织中获得了正确的hVEGF165基因序列,并成功构建pcDNA3.1/hVEGF165,且实现转染COS-7细胞的瞬时表达。结论构建的pcDNA3.1/hVEGF165转染真核细胞COS-7能够表达rhVEGF蛋白。 |
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 基因克隆 基因表达 |
| 文章编号： | 1007-4848(2005)03-0185-04 |
| 修稿时间： | 2004年9月13日 |
hVEGF165 Gene Clone and Its Expression in COS-7 Cells |
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| GE Jian-jun,ZHOU Zheng-chun,CHEN Bing,ZHANG Sheng-quan,LUO Xin,XU Cong-zhen,WANG Si-ying.hVEGF165 Gene Clone and Its Expression in COS-7 Cells[J].Chinese Journal of Clinical Thoracic and Cardiovascular Surgery,2005,12(3):185-188. | |
| Authors: | GE Jian-jun ZHOU Zheng-chun CHEN Bing ZHANG Sheng-quan LUO Xin XU Cong-zhen WANG Si-ying |
| Abstract: | |
| Keywords: | Vascular endothelial growth factor Gene clone Gene expression |
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