| PEP-1介导的重组肝细胞核因子4α蛋白转导对肝癌细胞的抑制作用 |
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| 引用本文： | 邓龙飞,丁晨虹,谢渭芬,张新. PEP-1介导的重组肝细胞核因子4α蛋白转导对肝癌细胞的抑制作用[J]. 第二军医大学学报, 2015, 36(9): 929-935 |
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| 作者姓名： | 邓龙飞 丁晨虹 谢渭芬 张新 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物工程学院,上海长征医院消化内科,上海长征医院消化内科,华东理工大学生物工程学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81372675),国家科技重大专项(2013ZX10002007-007). Supported by National Natural Science Foundation of China (81372675), and the National Science and Technology Major Project (2013ZX10002007-007). |
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| 摘 要： | 目的 利用细胞穿膜肽PEP-1介导重组肝细胞核因子4α（HNF4α）蛋白进入肝癌细胞，并明确外源融合蛋白P-HNF4α对肝癌细胞的作用。方法 构建表达质粒pET28a-P-HNF4α，优化原核表达体系的诱导条件，经大量表达、亲和层析纯化以及浓缩、透析后获得纯度较高的带有细胞穿膜肽PEP-1的融合蛋白P-HNF4α；P-HNF4α转导人肝癌细胞，Western blot检测其穿膜效率，核浆分离和细胞免疫荧光检测P-HNF4α的亚细胞定位，Real-time PCR检测肝癌细胞基因表达，CCK-8法检测肝癌细胞的增殖，细胞划痕实验以及小室侵袭实验检测P-HNF4α对肝癌细胞转移能力的影响。结果 细胞穿膜肽PEP-1成功介导融合蛋白P-HNF4α进入Huh7细胞并定位于细胞核；P-HNF4α蛋白可促进Huh7细胞肝功能基因的表达，抑制干细胞相关基因的表达，并显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论 P-HNF4α可诱导肝癌细胞向成熟肝细胞分化，降低肝癌细胞的恶性程度，提示利用P-HNF4α转导肝癌细胞是诱导分化治疗肝癌的潜在手段。
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| 关 键 词： | 肝细胞癌 HNF4α 穿膜肽 PEP-1 |
| 收稿时间： | 2014-12-17 |
| 修稿时间： | 2015-08-03 |
Inhibitory effect of PEP-1-mediated recombinant hepatocyte nuclear factor 4 alpha transduction on hepatocellular carcinoma cells |
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| DENG Long-fei,DING Chen-hong,XIE Wei-fen and ZHANG Xin. Inhibitory effect of PEP-1-mediated recombinant hepatocyte nuclear factor 4 alpha transduction on hepatocellular carcinoma cells[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2015, 36(9): 929-935 |
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| Authors: | DENG Long-fei DING Chen-hong XIE Wei-fen ZHANG Xin |
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| Affiliation: | School of Biotechnology,EastSChinaSUniversitySofSScienceSandSTechnology,Department of Gastroenterology,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Department of Gastroenterology,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,School of Biotechnology,EastSChinaSUniversitySofSScienceSandSTechnology |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatocellular carcinoma hepatocyte nuclear factor-4 alpha cell penetrating peptide PEP-1 |
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