抗恶性疟原虫重组谷氨酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定

目的 制备抗恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)的单克隆抗体(McAb)，并对其特异性进行鉴定。方法 用柱层析纯化的GDH／GST重组融合蛋白免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备McAb，用ELISA和有限稀释法筛选出分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株，用protein-G亲和层析纯化接种杂交瘤细胞的小鼠腹水，测定其免疫球蛋白亚类及其效价，Western blot分析其特异性。结果 筛选出6株能稳定分泌抗GDH单克隆抗体的杂交瘤细胞株，单抗均为IgGl，Western blot分析显示，6株单抗都与重组的GDH发生特异性结合。结论 制备的抗GDH杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗，为疟疾诊断技术的进一步研究奠定了基础。