| 银染mRNA差异显示方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈晓梨,陈鑫基,郑静,张昭秀,胡建达. 银染mRNA差异显示方法的建立[J]. 福建医科大学学报, 2002, 36(3): 247-249 |
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| 作者姓名： | 陈晓梨 陈鑫基 郑静 张昭秀 胡建达 |
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| 作者单位： | 福建医科大学,附属协和医院、福建省血液病研究所,福州,350001 |
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| 基金项目： | 福建省医学创新课题资助项目 (2 0 0 1-CX-0 2 ) |
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| 摘 要： | 目的：建立银染mRNA差异显示方法，为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础，方法：采用随机引物和锚定引物各1条，建立差异显示反转录聚合酶链式反应（DDRT－PCR）和银染方法，对DDRT－PCR过程中各实验影响因素进行优化，割取差异条带进行二次扩增。结果：当总RNA用量为0．2ug，引物浓度为0．6－1．0umol/L,dNTP浓度为200unmol/L,MgCl2浓度为1．6－2.0mmol/L，时，同时起始5个循环的退火温度为50℃，扩增效率最佳，特异性好，背景 干净，结论：DDRT－PCR方法简便，灵敏，高效，可用于分离差异表达基因。
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| 关 键 词： | 银染mRNA差异显示方法 基因扩增 差异表达基因 克隆 DDRT－PCR |
| 文章编号： | 1000-2235(2002)03-0247-03 |
Establishment of Differential Display RT-PCR with Silver Staining of mRNA |
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| CHEN Xiao|li,CHEN Xin|ji,ZHENG Jing,et al. Establishment of Differential Display RT-PCR with Silver Staining of mRNA[J]. Journal of Fujian Medical University, 2002, 36(3): 247-249 |
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| Authors: | CHEN Xiao|li CHEN Xin|ji ZHENG Jing et al |
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