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G9a特异性siRNA表达载体的构建及在QBC939细胞中对G9a基因表达的影响
引用本文:陈勇军,罗剑,郑建伟,陈波,王剑明,邹声泉. G9a特异性siRNA表达载体的构建及在QBC939细胞中对G9a基因表达的影响[J]. 中华普通外科杂志, 2007, 22(7): 530-532
作者姓名:陈勇军  罗剑  郑建伟  陈波  王剑明  邹声泉
作者单位:430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)资金资助项目(2002AA214061)
摘    要:目的构建特异性组蛋白甲基转移酶G9a基因的siRNA表达载体并检测QBC939细胞对G9a表达的抑制作用。方法设计、合成G9a特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段.克隆到pSilencer neo^TM2.1-U6载体中,构建G9a特异性siRNA的表达载体。EcoRⅠ+BamHⅠ和EcoRⅠ+HindⅢ双酶切及测序鉴定重组体,并转染QBC_(939)细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量RT-PCR方法和Western印迹法检测G9a mRNA和蛋白的表达水平。结果双酶切与测序鉴定证实成功构建了G9a-siRNA表达载体,转染人胆管癌细胞株QBC939后,在mRNA和蛋白表达水平对G9a的抑制率分别为55.2%和54.8%。结论运用pSileneer neo^TM2.1-U6载体构建的G9a-siRNA表达载体可有效抑制G9a在胆管癌细胞株QBC939中的表达。

关 键 词:胆管肿瘤 基因 组蛋白甲基转移酶 G9a siRNA
修稿时间:2006-11-14

Construction of G9a specific siRNA expressing vector and its influence on G9a expression in cholangiocarcinoma QBC939 cell lines
CHEN Yong-jun,LUO Jian,ZHENG Jian-wei,CHEN Bo,WANG Jian-ming,ZOU Sheng-quan. Construction of G9a specific siRNA expressing vector and its influence on G9a expression in cholangiocarcinoma QBC939 cell lines[J]. Chinese Journal of General Surgery, 2007, 22(7): 530-532
Authors:CHEN Yong-jun  LUO Jian  ZHENG Jian-wei  CHEN Bo  WANG Jian-ming  ZOU Sheng-quan
Affiliation:Department of Biliary-pancreatic Surgery, Tongfi Hospital, Tongfi College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:Bile duct neoplasms   Genes    Histone methyltransferase   G9a   siRNA
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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