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| HIV-1 SF2株env基因C1与C3区的嵌合表达 | |
| 引用本文： | 朱元祺,姜岩,王斌,钱冬萌. HIV-1 SF2株env基因C1与C3区的嵌合表达[J]. 青岛大学医学院学报, 2003, 39(4): 421-423 |
| 作者姓名： | 朱元祺 姜岩 王斌 钱冬萌 |
| 作者单位： | 1. 青岛市第五人民医院检验科,山东,青岛,266002 2. 青岛市胸科医院检验科 3. 青岛大学医学院微生物学教研室 |
| 摘 要： | ①目的 构建HIV-1SF2株env基因C1与C3区嵌合片段的克隆并在大肠杆菌中表达。②方法 用DNAstar软件辅助设计引物，以含有HIV-1SF2株前病毒基因组的9B1R6质粒为模板，PCR法分别扩增出env基因C1和C3段；两个片段经KpnⅠ酶切、T4连接酶连接和扩增后，再将经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切的嵌合片段插入表达载体pGEX-4T-2中，构建重组表达质粒pGEX-4T-2／ClC3；重组质粒经酶切、测序鉴定后，以TSS法转入大肠杆菌DH5α，IPTG诱导表达融合蛋白和SDS—PAGE电泳分析表达蛋白图谱。③结果 经酶切和测序分析，插入片段大小、方向和读码框架正确，无碱基错配，表明成功构建pGEX-4T-2／ClC3克隆；重组克隆在大肠杆菌DH5α中经IPTG诱导，高效表达出相对分子质量为4．3万的融合蛋白。④结论 重组质粒pGEX-4T-2／C1C3的构建和表达成功，为进一步研究该表达蛋白的活性和HIV疫苗的研制奠定了基础。 |
| 关 键 词： | HIV—1 SF2株 env基因 C1区 C3区 基因表达 质粒 重组融合蛋白质 |
| 文章编号： | 1672-4488(2003)04-0421-03 |
| 修稿时间： | 2003-06-13 |
CLONING AND EXPRESSION OF THE LINKED FRAGMENT OF C1 AND C3 CONSTANT REGIONS OF ENVELOPE GENE FROM HIV-1 SF2 STRAIN IN E.coli DH5α |
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| ZHU Yuan qi,JIANG Yan,WANG Bin,et al. CLONING AND EXPRESSION OF THE LINKED FRAGMENT OF C1 AND C3 CONSTANT REGIONS OF ENVELOPE GENE FROM HIV-1 SF2 STRAIN IN E.coli DH5α[J]. Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis, 2003, 39(4): 421-423 | |
| Authors: | ZHU Yuan qi JIANG Yan WANG Bin et al |
| Abstract: | |
| Keywords: | HIV 1 gene envelope gene expression viral fusi on proteins plasmid |
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