| 绿色荧光蛋白报道基因转染鼻咽癌细胞系CNE1后的表达:用做转染报道基因的可行性鉴定 |
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| 引用本文： | 唐泽立,苏维勇,陈小毅,陈燕,谢玲.绿色荧光蛋白报道基因转染鼻咽癌细胞系CNE1后的表达:用做转染报道基因的可行性鉴定[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(28):5486-5489. |
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| 作者姓名： | 唐泽立 苏维勇 陈小毅 陈燕 谢玲 |
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| 摘 要： | 目的:将经过"人类化"改造的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因质粒导入鼻咽癌CNE1细胞系内,观察GFP报道基因转染鼻咽癌细胞系CNE1后的表达情况.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.将带有GFP报道基因的质粒PAT-GFP及PAT-GFP-LMP1在电容960 μ F,280 V条件下电导转染到鼻咽癌CNE1细胞系中,用选择培养液(嘌呤霉素筛选)继续换液培养直至长出抗性细胞克隆,胰酶消化收集细胞.存488 nm光激发下,用荧光显微镜检测及流式细胞仪观察转染细胞在活的、固定后或裸鼠体内移植后3组细胞的GFP的表达情况并计算转染效率,并用免疫组化法及Western blot法观察插入目的基因LMP1的表达情况.结果:温度在28～32℃的条件下活细胞有GFP基因稳定而持续地表达,但表达较低,表达率为(16.20±1.70)%,且目的基因LMP1的插入明显影响GFP基因的表达,表达率为(3.48±0.28)%,而在固定后或裸小鼠体内移植后均无表达;目的基因LMP1则能稳定而持续地表达.结论:绿色荧光蛋白报道基因GFP在CNE1细胞系中能稳定而持续地表达,且不影响插入目的基因的表达,可用做转染报道基因.
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 标记基因 鼻咽肿瘤 CNE1细胞 |
Expression of a "humanized" green fluorescent protein reporter gene in nasopharyngeal carcinoma cell line CNE1: Feasibility evaluation as transfected reporter gene |
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| Tang Ze-li,Su Wei-yong,Chen Xiao-yi,Chen Yan,Xie Ling.Expression of a "humanized" green fluorescent protein reporter gene in nasopharyngeal carcinoma cell line CNE1: Feasibility evaluation as transfected reporter gene[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(28):5486-5489. |
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| Authors: | Tang Ze-li Su Wei-yong Chen Xiao-yi Chen Yan Xie Ling |
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