α-突触核蛋白功能片段对大鼠原代培养神经元的促生长作用

目的 研究α-突触核蛋白(α-Syn)对Wistar大鼠原代培养神经元的促生长作用.方法 培养新生24h的Wistar大鼠大脑皮质神经元,以一定密度接种至培养皿中.设计分组,在各组别培养基中加入α-Syn和它的功能片段NAC段、N端和C端.培养至1、2、4h固定观察,计数存活神经元的数目.Western印迹法、免疫荧光法进行特异性鉴定.结果 当原代神经元培养至第1、2小时,α-Syn组和C端组的神经元数目比对照组多(P＜0.05),N端组和NAC段组与对照组无差异(P＞0.05)；培养至第4小时,α-Syn组和C端组的存活神经元数目比对照组明显增多(P＜0.01),而N端组和NAC段组与对照组无差异(P＞0.05).增加C端浓度,可以提高神经元的存活率(P＜0.05).Western印迹法和免疫荧光法证实蛋白质片段N端和C端可由培养基进入到原代神经元中,而NAC片段不能进入神经元.结论 α-Syn在原代神经元培养初期对其生长有促进作用,具有这一功能的蛋白片段为C端,其可能的机制是进入到神经元内,促进胞内代谢活动,从而利于神经元的生长.