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铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响
引用本文:何银锋,张鹏,赵国阳,张林林,高超,沈光思,赵理平,张增利,林华,徐又佳.铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响[J].中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2013(1):37-43.
作者姓名:何银锋  张鹏  赵国阳  张林林  高超  沈光思  赵理平  张增利  林华  徐又佳
作者单位:苏州大学附属第二医院骨科;苏州大学公共卫生学院;南京大学附属鼓楼医院骨科
基金项目:国家自然科学基金(81273090);江苏省自然科学基金(BK2012608);苏州市科技基础设施建设计划之高技术重点实验室资助项目(SZS2012208)
摘    要:目的了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响。方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)表达的变化;用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞铁离子荧光强度;流式细胞仪检测成骨细胞活性氧(ROS)水平;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;Vonkossa染色法行钙结节染色。结果与对照组相比,FAC干预48h后FPN1mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P0.05);FAC干预48h后成骨细胞铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);48h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P0.05);FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,FAC干预17d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少。结论铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用,其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关。

关 键 词:人成骨细胞  铁过载  铁稳态  活性氧  生物活性
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