DAPT预处理对脑缺血/再灌注损伤小鼠的神经保护作用

目的 探讨N-N-(3,5-双氟酚内氨酰)]-S-苯氨基乙酸t-丁基酯(DAPT)预处理对脑缺血/再灌注损伤小鼠的神经保护作用及其机制.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、大脑中动脉缺血/再灌注组(模型组)、DAPT预处理+大脑中动脉缺血/再灌注组(DAPT预处理组).DAPT预处理组小鼠造模前连续7 d每天腹腔注射1次DAPT,而模型组和假手术组小鼠腹腔注射等量生理盐水.采用线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,在小鼠脑缺血2 h及再灌注24 h后采用Longa生物学评分对小鼠的神经功能缺损状况进行评估;采用TUNEL染色评估小鼠神经元细胞凋亡情况及2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察小鼠脑梗死体积;Western blot检测小鼠脑组织Notch1、Hes1及Hes5蛋白相对表达水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析小鼠脑组织的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)的mRNA相对表达水平;ELISA法对小鼠脑组织中IL-1β和TNF-α的表达水平进行检测.结果 假手术组的神经元凋亡数、脑梗死体积、Longa生物学评分分别为(4.00±1.58)个、0 mm3、0分,模型组分别为(75.00±2.74)个、(42.37±0.85)mm3、(2.12±0.39)分,DAPT预处理组分别为(33.60±2.41)个、(19.87±1.18)mm3、(1.29±0.25)分,以上指标3组组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05).模型组的IL-1β、TNF-α表达水平,GFAP mRNA、STAT3 mRNA相对表达水平显著高于假手术组(P<0.05),而DAPT预处理组上述指标较模型组显著降低(P<0.05);模型组Hes1、Hes5和Notch1蛋白相对表达水平较假手术组明显升高(P<0.05),而DAPT预处理组上述指标较模型组明显降低(P<0.05).结论 DAPT预处理能抑制Notch信号通路并下调Hes1、Hes5及STAT3、GFAP水平,从而对脑缺血/再灌注损伤小鼠产生神经保护作用.

Neuroprotective effect of DAPT preconditioning on cerebral ischemia-reperfusion inj ury in mice