羟基喜树碱对肝纤维化大鼠肝组织Bax、Bcl-2基因和α-SMA蛋白表达及肝纤维化的影响

目的 考察羟基喜树碱（hydroxycamptothecin，HCPT）对肝纤维化大鼠肝组织中Bax、Bcl-2基因和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达及肝纤维化的影响。方法 64只SD大鼠随机分为5组：正常组、模型组、低剂量 HCPT治疗组、中剂量HCPT治疗组、高剂量HCPT治疗组。采用40%四氯化碳（CCl₄）诱导大鼠肝纤维化模型。正常组给予生理盐水腹腔注射；3个治疗组在造模同时分别给予0.25、0.5、1.0 mg/kg HCPT腹腔注射，3次/周，共8周。各组分别在第8周末取肝脏组织，行H-E、Masson染色观察肝脏组织病理学改变；RT-PCR检测肝脏组织中Bax、Bcl-2 mRNA表达并计算Bax/Bcl-2 mRNA比值；免疫组化染色检测肝脏组织中α-SMA蛋白表达；TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果 模型组大鼠出现明显的肝纤维化（Ⅲ期2例，Ⅳ期8例），各HCPT治疗组的肝纤维化程度较模型组减轻（低剂量组Ⅱ期1例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例；中剂量组Ⅱ期7例，Ⅲ期3例；高剂量组Ⅰ期1例，Ⅱ期7例，Ⅲ期2例），差异有统计学意义（P均<0.05）。RT-PCR检测显示模型组Bax、Bcl-2 mRNA较正常组升高，而各HCPT治疗组较模型组降低（P均<0.05）；模型组Bax/Bcl-2 mRNA比值低于各HCPT治疗组（P均<0.05）。免疫组化染色检测显示模型组α-SMA蛋白表达水平高于中、高剂量HCPT组（P<0.05）。TUNEL染色结果显示正常组、模型组无明显阳性染色，各HCPT治疗组均有阳性染色。结论 HCPT对CCl₄诱导的肝纤维化大鼠模型具有防治作用，抑制肝星状细胞活化增殖，上调Bax/Bcl-2 mRNA比值可能是HCPT抗肝纤维化的部分机制。