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实验动物皮肤病原真菌多重PCR检测方法的建立与初步应用
引用本文:邢进.实验动物皮肤病原真菌多重PCR检测方法的建立与初步应用[J].中国比较医学杂志,2015,25(12):65-70.
作者姓名:邢进
作者单位:中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所, 北京 100050;中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所, 北京 100050;中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所, 北京 100050;中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所, 北京 100050
基金项目:国家科技支撑计划项目:实验动物新品种的种群建立与质量标准化研究(编号:2011BAI15B01)。
摘    要:目的 建立石膏样毛癣菌(Tm)、石膏样小孢子菌(Mg)、犬小孢子菌(Mc)和猴类毛癣菌(Am)的多重PCR检测方法,用于实验动物皮肤病原真菌的快速检测。方法 根据Genbank公布的四种皮肤病原真菌的18S-28S rRNA序列设计特异性引物,通过引物、dNTP、TaqDNA聚合酶浓度及退火温度和时间的优化,建立四种皮肤病原真菌的多重PCR体系。经特异性和敏感性检验后,对15份人工感染真菌大鼠毛和260份实验动物毛发样本进行检测。结果 所建多重PCR方法能够有效区分四种皮肤病原真菌,产生192 bp(Tm)、460 bp(Mg)、290 bp(Mc)和602 bp(As)的目的片段,最低检测限分别为5.9 pg/μL、6.6 pg/μL、9.5 pg/μL和5.1 pg/μL。被检的15份人工感染样本扩增结果准确,260份毛发样本中未检测出四种真菌。结论 所建立的多重PCR方法能够同时对实验动物中的四种皮肤病原真菌进行快速的检测,具有较高的应用价值。

关 键 词:皮肤病原真菌  多重PCR  检测方法  实验动物
收稿时间:2015/9/15 0:00:00
修稿时间:2015/10/8 0:00:00

Development and Application of a Multiplex PCR Assay for Pathogenic Dermatophytes in Laboratory Animals
Xingjin.Development and Application of a Multiplex PCR Assay for Pathogenic Dermatophytes in Laboratory Animals[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2015,25(12):65-70.
Authors:Xingjin
Institution:National Institute of Food and Drug Control, Institute of Laboratory Animal Resources, Beijing 100050, China;National Institute of Food and Drug Control, Institute of Laboratory Animal Resources, Beijing 100050, China;National Institute of Food and Drug Control, Institute of Laboratory Animal Resources, Beijing 100050, China;National Institute of Food and Drug Control, Institute of Laboratory Animal Resources, Beijing 100050, China
Abstract:
Keywords:Dermatophytes  Multiplex PCR  Detection method  Laboratory animals
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