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人结核杆菌HSP70原核表达质粒的构建及其抗肿瘤效应
引用本文:杨瑞,陈正跃,王淑秀.人结核杆菌HSP70原核表达质粒的构建及其抗肿瘤效应[J].实用儿科临床杂志,2006,21(10):627-629.
作者姓名:杨瑞  陈正跃  王淑秀
作者单位:1. 新乡医学院分子生物研究室,河南,新乡,453003
2. 新乡医学院药物研究室,河南,新乡,453003
3. 新乡医学院病理教研室,河南,新乡,453003
基金项目:河南省教育厅自然科学基金
摘    要:目的构建可在大肠杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)基因的表达质粒,并经纯化后研究重组蛋白rHSP70抗肿瘤效应。方法采用基因工程技术将HSP70基因经PCR及末端修饰后装入大肠杆菌质粒pRSET-B中,构建成新的重组质粒pMT70-3。诱导表达纯化后经Western-blot、抗原肽结合试验、native-page鉴定,在有ADP、MgCl2存在时利用重组人 TB的HSP70与小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210的上清于37℃温育形成HSP70-肿瘤抗原肽复合物,以此作为抗原进行体内肿瘤免疫保护试验。结果 HSP70基因的表达质粒构建成功,其产物人TB rHSP70经纯化后具有生物活性。实验动物的腹水量较对照组下降,表明该复合物可引起一定的免疫保护反应(与对照组比较P<0.05)。结论人TB rHSP70-肿瘤抗原肽复合物免疫刺激后可使小鼠产生针对同种肿瘤的强烈免疫作用,与其剂量有一定的相关性。人TB HSP70不仅可起到免疫佐剂的作用,且肿瘤抗原肽复合物也起到一定的抗肿瘤作用。

关 键 词:结核杆菌  原核质粒  热休克蛋白70  抗原肽  肿瘤
文章编号:1003-515X(2006)10-0627-03
收稿时间:2006-03-14
修稿时间:2006年3月14日

Construction of Prokaryotic Plasmid of Mycobacterium Tuberculosis Heat Shock Protein 70 and Characterizing Its Antitumor Role
YANG Rui,CHEN Zheng-yue,WANG Shu-xiu.Construction of Prokaryotic Plasmid of Mycobacterium Tuberculosis Heat Shock Protein 70 and Characterizing Its Antitumor Role[J].Journal of Applied Clinical Pediatrics,2006,21(10):627-629.
Authors:YANG Rui  CHEN Zheng-yue  WANG Shu-xiu
Institution:1. Moliecular Biology Laboratory; 2. Pharmaceutical Laboratory; 3. Deparment of Pathology, Xinxiang Medical College, Xinxiang 453003, China
Abstract:
Keywords:mycobacterium tuberculosis  prokaryotic plasrnid  heart shock protein 70  antigen peptide  tumor
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