载脂蛋白M基因启动子的克隆及荧光素酶报告基因载体的构建 |
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引用本文: | 黄健,黄韻祝,杨国珍.载脂蛋白M基因启动子的克隆及荧光素酶报告基因载体的构建[J].中国医药科学,2013(11). |
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作者姓名: | 黄健 黄韻祝 杨国珍 |
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作者单位: | 贵阳医学院附属医院生化科;贵阳医学院医学检验学院; |
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基金项目: | 贵阳医学院国家级教学团队专项基金(0703003) |
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摘 要: | 目的为深入研究载脂蛋白M(ApoM)基因的表达调控机制,对ApoM基因启动子序列进行克隆,并构建不同长度启动子荧光素酶报告基因载体。方法在NCBI人类基因组数据库中截取并下载ApoM基因转录起始位点5’侧翼区约2kb的基因组序列设计PCR扩增引物,从健康外周血中扩增获得该片段,以此序列为基础进行亚克隆,分别获得6条5’端不等、3’端平齐的片段,最后插入pGL3-Basic表达载体。结果获得了6条长度差别约为200bpApoM启动子片段,并构建了不同长度的pGL3-ApoM真核表达载体。结论上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究ApoM基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。
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关 键 词: | 载脂蛋白M基因 启动子 荧光素酶报告基因 构建 |
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