阿尔茨海默病Aβ40人单链抗体在毕赤酵母的表达

目的 重组表达抗Aβ40的人单链抗体，为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料。方法 将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗Aβ40人单链抗体基因，突变BamHI酶切位点，克隆连接到T载体，经过PCR和酶切鉴定。EcoRI和NotI双酶切pT-scFvAβ40质粒，连接到经过同样酶切的pPIC9K载体构建pPIC9K-scFvAβ40质粒，经过基因测序验证。线性化pPIC9K-scFvAβ40，转化GS115毕赤酵母，经0．5％甲醇诱导表达抗Aβ40的人单链抗体。结果 基因测序证实pPIC9K-scFvAβ40序列正确，转化GS115获得重组菌株。经过0．5％甲醇诱导，重组菌株分泌表达分子质量大小约为33kD的蛋白质。结论 成功构建pPIC9K-scFvAβ40质粒，Aβ40的人单链抗体在毕赤酵母系统得以重组表达。