UII/UT系统对急性肝衰竭小鼠肝组织自噬水平的影响

目的探讨尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)及其受体系统(urotensin Ⅱ receptor,UT)对急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)小鼠肝脏自噬水平的影响.方法♂Balb/c小鼠随机分为4组(每组6只).A组:健康对照组;B组:预处理对照组;C组:模型组;D组:预处理模型组.B组和D组给予0.6 mg/kg Urantide尾静脉注射预处理.30 min后,C组和D组立即以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-Gal N)腹腔注射诱导急性肝衰竭.LPS/D-Gal N攻击6 h后采集小鼠血清和肝组织样本.测量血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平以评价肝损伤情况.采用实时荧光定量PCR(realtime PCR,RT-PCR)检测Beclin-1、Atg5(autophagy related 5)、Atg7、Sqstm1(sequestosome 1)/p62和LC3 mRNA(microtubule-associated protein 1 light chain 3)水平,采用免疫印记技术(Western blot)检测LC3及p62蛋白质含量.结果模型组和预处理模型组ALT和AST水平与健康对照组和预处理对照组相比较均明显增高(P0.01),其中预处理模型组较模型组明显降低(P0.01).RT-PCR结果显示模型组和预处理模型组小鼠肝组织中Beclin-1、Atg5、Atg7、p62和LC3 mRNA水平均较健康对照组和预处理对照组低(P0.05);而模型组和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自间比较均无统计学差异(P0.05).Western blot结果也显示,模型组和预处理模型组小鼠肝组织中L C3和p62蛋白水平均较健康对照组和预处理对照组低(P0.05);而模型组和预处理模型组、健康对照组和预处理对照组各自间比较均无统计学差异(P0.05).结论 UⅡ/UT系统对LPS/D-GalN诱导ALF小鼠下调的肝组织自噬水平无明显影响.