大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定 |
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引用本文: | 王咏枝,屈会化,邢洪霞,张越,成金俊,熊威,罗娟,赵琰,孔慧,王庆国.大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定[J].中国中医药信息杂志,2018(5). |
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作者姓名: | 王咏枝 屈会化 邢洪霞 张越 成金俊 熊威 罗娟 赵琰 孔慧 王庆国 |
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作者单位: | 北京中医药大学中药学院;北京中医药大学中医药研究院;曲阜市中医院;北京中医药大学中医学院 |
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摘 要: | 目的合成大黄酸人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清。方法采用碳二亚胺法制备大黄酸人工抗原,将大黄酸分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联。用紫外扫描法鉴定大黄酸人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔,制备多抗血清,通过间接竞争ELISA测定抗血清效价,通过间接竞争ELISA鉴定抗血清的敏感性和特异性,并分别用间接竞争ELISA和HPLC检测大黄中大黄酸的含量。结果 2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64 000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度为0.09 ng/mL,且具有良好的特异性。兔抗血清测得大黄中大黄酸含量为(0.026±0.001)%,HPLC测得大黄中大黄酸含量为(0.027±0.000)%。结论本研究制备了敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗体血清,为建立大黄酸免疫亲和色谱分析技术和快速检测方法奠定了基础。
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