骨髓间质干细胞的胞质体制备及其活性

背景：细胞质在细胞分化过程中起着决定作用，但目前的实验很难获得大量的、有活性的胞质体。目的：分析影响大鼠骨髓间质干细胞胞质体制备的因素，并观察胞质体活性，以期为细胞重组提供实验依据。设计、时间及地点：以细胞为观察对象的多因素设计实验，于2006—09／2007-01在南京医科大学基础医学院卫生部抗体技术重点实验室完成。材料：选用1月龄SD大鼠，用于分离骨髓间充质干细胞。方法：骨髓间质干细胞经分离培养、扩增后，用松胞素B、秋水仙碱结合离心术制备胞质体。主要观察指标：应用苏木精-伊红、Alexa-Flour 488anti-rat CD106及Bis—Benzimide染色进行形态学观察，计算胞质体纯度；应用Rhodamine123标记后用流式细胞仪检测胞质体中线粒体膜势能。结果：①胞质体纯度可达95％。80％的胞质体在一两个小时内恢复原来形态，但其生活力不会超过18h。胞质体活性随时间延长而下降。②骨髓间质干细胞的胞质体制备与松弛索B、秋水仙碱剂量、离心速度、离心时间，特别是离心温度有关。结论：骨髓间质干细胞的胞质体制备可受多因素影响。当胞质体具有活性，具有有核细胞的一些行为特征时，可以进行细胞重组。

Preparation and activity of cytoplasts from bone marrow mesenchymal stem cells