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SA-IL-7融合蛋白的制备及其膀胱内灌注对小鼠表浅性膀胱癌的治疗效应
引用本文:张振,贺利民,马磊,李金龙,许晓玲,高基民.SA-IL-7融合蛋白的制备及其膀胱内灌注对小鼠表浅性膀胱癌的治疗效应[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2013,20(5):529-534.
作者姓名:张振  贺利民  马磊  李金龙  许晓玲  高基民
作者单位:南阳市第一人民医院 肿瘤科,河南 南阳 473000;南阳市第一人民医院 肿瘤科,河南 南阳 473000;南阳市第一人民医院 肿瘤科,河南 南阳 473000;南方医科大学 生物治疗研究所,广东 广州 510515;温州医科大学 浙江省模式生物技术与应用重点实验室,浙江 温州 325035;温州医科大学 浙江省模式生物技术与应用重点实验室,浙江 温州 325035
基金项目:国家863计划基金资助项目(No. 2006AA02Z4C4),浙江省自然科学基金资助项目(No. R2080407)
摘    要:目的:制备链亲和素标记的白介素7(streptavidin-tagged interleukin-7, SA-IL-7)融合蛋白,评价其对小鼠表浅性膀胱癌治疗的效果。方法:构建pET24a-SA-IL-7重组质粒,制备SA-IL-7融合蛋白。流式细胞术检测SA-IL-7融合蛋白与生物素化膀胱癌细胞MB49的结合,胸腺细胞增殖法检测SA-IL-7融合蛋白促进胸腺细胞增殖的生物学活性。应用小鼠表浅性膀胱癌模型评价膀胱内灌注SA-IL-7的治疗效果,观察小鼠生存期,免疫组化法检测各组小鼠肿瘤浸润CD8+T细胞。结果:成功制备的SA-IL-7融合蛋白可锚定于生物素化的MB49细胞表面,结合率达(96.6±1.3)%;同时能够促进胸腺细胞的增殖。SA-IL-7融合蛋白能够锚定于小鼠生物素化的膀胱黏膜表面7 d以上,而未生物素化的膀胱黏膜在始终未检测到IL-7的存在。在小鼠表浅型膀胱癌模型中,MB49细胞接种后的第80天,IL-7灌注治疗组90%小鼠死亡,而SA-IL-7组60%小鼠存活且未出现肿瘤(P<0.05);且SA-IL-7灌注治疗组小鼠肿瘤组织中浸润CD8+T细胞明显增多(P<0.01)。SA-IL-7治愈的15只表浅型膀胱癌模型小鼠中,11只能够抵抗膀胱内MB49细胞的第二次接种,而对照组15只小鼠仅1只幸存(P<0.01)。结论:SA-IL-7融合蛋白膀胱内灌注能够产生抗肿瘤免疫应答和明显的治疗效果,有可能成为免疫治疗浅表性膀胱癌的新方法。

关 键 词:白细胞介素7  链亲和素  生物素  融合蛋白  表浅性膀胱癌

Preparation of streptavidin-tagged interleukin-7 fusion protein and its therapeutic effect with intravascal instillation on mouse superficial bladder cancer
Zhang Zhen,He Limin,Ma Lei,Li Jinlong,Xu Xiaoling and Gao Jimin.Preparation of streptavidin-tagged interleukin-7 fusion protein and its therapeutic effect with intravascal instillation on mouse superficial bladder cancer[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2013,20(5):529-534.
Authors:Zhang Zhen  He Limin  Ma Lei  Li Jinlong  Xu Xiaoling and Gao Jimin
Abstract:
Keywords:interleukin-7  streptavidin  biotin  fusion protein  superficial bladder cancer
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