| NucleofectorTM电转仪转染外源基因至骨髓基质细胞优化方案 |
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| 引用本文： | 王海澜,潘明新,张会迎,何志英,安靓,高毅. NucleofectorTM电转仪转染外源基因至骨髓基质细胞优化方案[J]. 中华实验外科杂志, 2007, 24(8): 993-995 |
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| 作者姓名： | 王海澜 潘明新 张会迎 何志英 安靓 高毅 |
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| 作者单位： | 1. 510282,广州,南方医科大学珠江医院普外科
2. 南方医科大学组织胚胎学教研室 |
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| 摘 要： | 目的用Nucleofector^TM电转仪介导真核表达载体pEGFP-C1及pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源细胞，并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法将已构建好的重组载体以Nacleofector^TM电转仪转染不同方法获得的骨髓来源细胞，改变DNA的量、转染后血清浓度，在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率；转染后48h进行逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测目的基因的表达情况。结果相同条件下转染骨髓来源的神经干细胞（NSC）较转染骨髓基质细胞（MSC）可获得更高的转染效率；质粒2～10雌获得最佳的转染效率；提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率；RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin＋细胞有PDX-1表达。结论通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin＋细胞的效率，为成为组织工程的种子细胞提供了实验依据。
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| 关 键 词： | 骨髓基质细胞 电转染 基因表达 |
| 修稿时间： | 2006-11-09 |
Optimization protocol of gene PDX-1 transfer into rat bone marrow stromal cell by nucleofection |
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| WANG Hai-lan , PAN Ming-xin,ZHANG Hui-ying,et al.. Optimization protocol of gene PDX-1 transfer into rat bone marrow stromal cell by nucleofection[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2007, 24(8): 993-995 |
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| Authors: | WANG Hai-lan PAN Ming-xin ZHANG Hui-ying et al. |
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| Affiliation: | Department of General Surgery, Zhufiang Hospital,Nanfang Medical University , Guangzhou 510282 ,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bone marrow stromal cell Nucleofection Gene expression |
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