编码大鼠PRMT1基因shRNA质粒的构建和鉴定

目的研究蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）基因表达的改变与血管内皮功能及动脉粥样硬化的关系。方法构建PRMT1短发夹RNA（shRNA）质粒。在GenBank中查到犬鼠PRMT1基因mRNA序列并输入siRNA网上设计软件OptiRNA中，选取两条靶序列，设计并合成编码shRNA序列的DNA单链，经退火连接后，与双酶切线性化处理回收的pGenesil-1质粒载体连接，用含卡那霉素抗性的LB平板筛选阳性克隆，小提质粒后行酶切鉴定并测序。结果构建的大鼠PRMT1-shRNA质粒经酶切鉴定及测序与预期相符。结论本研究结果为进一步研究基因干扰PRMT1基因对血浆同型半胱氨酸（Hcy）、非对称性二甲基精氨酸（ADMA）水平及血管内皮功能的影响奠定了基础。