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肠道病毒71型实时荧光RT-PCR检测方法的建立及临床评价
引用本文:朱坤,高秀杰,邓中平,徐伟文,高旭年,李明.肠道病毒71型实时荧光RT-PCR检测方法的建立及临床评价[J].热带医学杂志,2010,10(5).
作者姓名:朱坤  高秀杰  邓中平  徐伟文  高旭年  李明
摘    要:目的 利用实时荧光RT-PCR技术,并通过系统的分析性能和临床性能评价,建立一种早期快速检测肠道病毒71型(EV71)的方法.方法 根据EV71基因组中编码衣壳蛋白VP1基因保守区序列设计一对引物和一条荧光探针,利用实时荧光RT-PCR技术建立了检测EV71的方法,并对扩增产物进行分析,同时进行灵敏度、特异性、精密度评价.在此基础上利用不同标本类型共1104例临床样本对本方法和RT-PCR方法进行对比分析.结果 本方法可以特异性的检测EV71,而对种属相近的或引起症状相似的其他病毒均无交叉反应.本方法检测灵敏度达到9.22×102 PFU/ml,不同浓度样本的Ct值的变异系数在1.4%~2.9%之间.1104例临床样本的研究显示本方法与RT-PCR方法检测结果的总符合率达到96.74%,阳性样本的检出率要高于RT-PCR方法.结论 本方法检测EV71具有灵敏度高、特异性强、精密度高、快速简便的特点,并与RT-PCR方法具有很好的符合率,在手足口病的早期快速诊断和疫情监测方面具有很好的应用前景.

关 键 词:肠道病毒71型  实时荧光RT-PCR  性能评价

Establishment and Evaluation of Enterovirus 71 Real-time RT-PCR Detection Kit
ZHU Kun,GAO Xiu-jie,DENG Zhong-ping,XU Wei-wen,GAO Xu-nian,LI Ming.Establishment and Evaluation of Enterovirus 71 Real-time RT-PCR Detection Kit[J].Journal Of Tropical Medicine,2010,10(5).
Authors:ZHU Kun  GAO Xiu-jie  DENG Zhong-ping  XU Wei-wen  GAO Xu-nian  LI Ming
Abstract:
Keywords:
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