六氟化硫微泡介导人脂联素基因兔主动脉内转染及表达☆

背景：超声微泡载基因传输技术是一种新兴起的定向传输基因技术。 目的：构建含人脂联素基因脂联素的真核表达载体，采用六氟化硫微泡介导脂联素基因进行兔主动脉转染及表达，为脂联素用于体内干预动脉粥样硬化的研究奠定基础。 方法：人心外膜脂肪组织提取总RNA构建pcDNA3.1-脂联素重组体，通过瞬时转染人脐静脉内皮细胞验证载体构建是否成功。21只大白兔随机分成对照组(n=6)和脂联素转基因组(n=15)，脂联素转基因组经兔耳缘静脉注射pcDNA3.1-脂联素与六氟化硫微泡的混合物，诊断超声仪照射兔胸腹主动脉区域，于照射后2，7，14 d取兔主动脉血管及血清，检测主动脉血管壁中脂联素基因的表达及血清中脂联素蛋白水平。 结果与结论：pcDNA3.1-脂联素瞬时转染入人脐静脉内皮细胞可有效表达。六氟化硫微泡传输脂联素基因2 d后即可检测到兔主动脉血管壁脂联素基因高表达，持续至14 d，且兔血清脂联素蛋白水平显著增加(P < 0.01)。说明pcDNA3.1-脂联素重组体构建成功，六氟化硫微泡可在快速血流状态下，安全、高效传输脂联素基因入兔主动脉血管壁并有效表达与分泌至血浆。关键词：六氟化硫微泡；脂联素；动脉粥样硬化；基因；重组质粒 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.010

Transfection and expression of human apM1 gene into the aorta of rabbits mediated by using ultrasound with SonoVue