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贴壁法与悬浮法诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞的对比研究
引用本文:李献帅,陈献国. 贴壁法与悬浮法诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞的对比研究[J]. 浙江中西医结合杂志, 2018, 28(3)
作者姓名:李献帅  陈献国
作者单位:浙江省金华市中心医院心胸外科;
摘    要:目的对比研究直接贴壁法与悬浮法分别诱导人胚胎干细胞分化为心肌细胞所需的时间、分化成功率,以及分化后细胞的活性、抗缺氧凋亡刺激的能力。方法人胚胎干细胞分别通过悬浮法和直接贴壁法诱导分化为心肌细胞。免疫荧光染色检测心肌细胞特异标志物c Tn T;显微镜下计数比较两组细胞诱导分化出现跳动心肌细胞的时间、百分比和跳动频率;跳动心肌细胞经过24h缺氧刺激后,用凋亡试剂盒检测心肌细胞凋亡比例。结果直接贴壁法诱导分化为心肌细胞的成功率更高(66.7%比20.8%,P0.05);大量的自发跳动心肌细胞出现时间直接贴壁法早与悬浮法,差异有统计学意义[(13.0±1.1)天比(13.9±0.9)天,P0.05];分化的心肌细胞c Tn T染色均阳性,均检测到自发性动作电位;分化后的心肌细胞平均跳动频率范围两种方法相仿[(63.0±7.0)次/分比(63.8±5.6)次/分,P0.05];跳动心肌细胞缺氧24h后检测到的凋亡比例比较差异无统计学意义[(8.0±0.5)%比(8.1±0.4)%,P0.05]。结论两种方法均能成功诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞,直接贴壁法分化成功率更高,所需分化时间较短;两种方法分化出的心肌细胞在细胞活性方面以及抗凋亡能力方面无明显差异。

关 键 词:人胚胎干细胞  分化  心肌细胞  贴壁法  悬浮法
收稿时间:2017-08-24
修稿时间:2018-01-11

Comparative Study of Directional Differentiation into Cardiomyocytes of Human Embryonic Stem Cells by Adherence Method and Suspension Method
Abstract:
Keywords:human embryonic stem cells   differentiation   cardiomyocytes   adherence method  suspension method
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