干扰ABCG2的表达对宫颈癌细胞化疗的增敏作用

目的探讨靶向宫颈癌He La细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体(ABC)G2基因的siRNA对He La细胞的化疗增敏作用。方法构建靶向ABCG2的RNA干扰重组慢病毒Ad-ABCG2-siRNA,感染宫颈癌耐药细胞耐丝裂霉素细胞He La/MMC后,筛选稳定表达细胞建立稳定表达细胞系。采用qRT-PCR、Western印迹分别从mRNA和蛋白水平检测细胞内ABCG2基因的表达,验证ABCG2的表达被成功下调,然后用MTT法测定He La/MMC细胞对化疗药物敏感性的变化;采用流式细胞分析仪检测细胞凋亡情况。结果成功构建靶向ABCG2的RNA干扰重组慢病毒Ad-ABCG2-siRNA,转染He La/MMC细胞后,经qRT-PCR、Western印迹检测,ABCG2的表达被成功下调;MTT法测定显示,经不同浓度的丝裂霉素处理后,ABCG2表达下调的He La/MMC细胞组(实验组)细胞抑制率明显高于未经干扰的He La/MMC细胞组(对照组),差异具有统计学意义(P0.05),药物敏感性提高3.42倍。流式细胞术分析结果显示,实验组He La/MMC细胞的总凋亡率(35.6±1.1)%]明显高于对照组(15.3±2.3)%],差异有统计学意义(P0.05)。结论下调ABCG2的表达对宫颈癌细胞具有化疗增敏作用,可促进耐药细胞He La/MMC的凋亡。