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鱼藤酮对MN9D细胞蛋白磷酸酶2A活力的影响
作者姓名:王屹  杜婷婷  刘舒佳  刘佳  卢勇泉  杨慧
作者单位:中国康复研究中心北京博爱医院检验科;首都医科大学康复医学院;首都医科大学附属北京天坛医院北京市神经外科研究所;中国康复研究中心北京博爱医院脊柱脊髓外科;首都医科大学基础医学院神经生物学系北京脑重大疾病研究院帕金森病研究所教育部神经变性病重点实验室;
摘    要:目的观察鱼藤酮是否诱导蛋白磷酸酶2A(PP2A)的活力下降,并探讨其机制。方法小鼠中脑多巴胺能细胞系MN9D细胞分为正常组(正常培养)、对照组(培养液中加入与鱼藤酮组等体积的二甲基亚砜)、鱼藤酮组(培养液中加入不同浓度鱼藤酮培养24 h)和鱼藤酮+C2组(5μmol/L C2-神经酰胺预处理8 h后,50 nmol/L鱼藤酮暴露24 h)。MTT法检测细胞活力,Western blotting分析总PP2A水平及酪氨酸磷酸化水平,比色法检测PP2A活性。结果与对照组相比,鱼藤酮组细胞活力明显下降(P0.01),PP2A催化亚基酪氨酸磷酸化提高(P0.01),PP2A活性降低(P0.05)。鱼藤酮+C2组PP2A酪氨酸磷酸化水平较鱼藤酮组明显降低(P0.01),PP2A活性提高(P0.05),细胞活力明显提高(P0.01)。结论鱼藤酮通过提高PP2A催化亚基307位点酪氨酸磷酸化水平,抑制PP2A活性,并可能参与细胞活力下降。可为发现帕金森病药物作用靶点提供参考。

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