| 重组法国梧桐花粉过敏原2( rPla a2) 对诱导型一氧化氮合酶( NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 乔笑芹,王进雅,路康,曹倩,周国平. 重组法国梧桐花粉过敏原2( rPla a2) 对诱导型一氧化氮合酶( NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响[J]. 中国免疫学杂志, 2018, 34(8): 1143 |
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| 作者姓名： | 乔笑芹 王进雅 路康 曹倩 周国平 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院儿科;南京医科大学第二附属医院儿科 |
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| 摘 要： | 目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2 启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对人NOS2 基因启动子活性及基因表达的影响。方法:利用PCR 扩增、限制性内切酶双酶切、DNA 连接酶连接、大肠杆菌转化等方法将NOS2 基因启动子区克隆至pGL3-Basic 载体上,将所构建重组报告质粒转染至人胚肾(HEK293T)细胞中,利用双荧光素酶活性分析检测该重组报告质粒启动子活性及检测rPla a2 对人NOS2 基因启动子活性的影响;用实时荧光定量PCR 法检测rPla a2 对人NOS2 基因mRNA 水平的影响。结果:成功构建含有NOS2 启动子的重组报告质粒,与对照(pGL3-Basic) 组相比,含NOS2 启动子区的重组质粒转染组荧光素酶活性显著增高;与不加刺激(NOS2)组相比,加入rPla a2 刺激后含NOS2 启动子区的重组报告质粒转染组荧光素酶活性显著增高,加入rPla a2 刺激后NOS2 mRNA 相对表达水平显著增高。结论:rPla a2 可增强人NOS2 基因启动子活性,并增加其基因表达。
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| 关 键 词： | 诱导型一氧化氮合酶(NOS2) 重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2) 启动子 哮喘 |
Recombinant platanus pollen allergen 2 (rPla a 2) up-regulates human NOS2 gene promoter activity and production |
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