| 小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层制备 |
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| 引用本文： | 叶珏,张燕婉,时娜,杨子鹤,宋莉,孟宪敏,徐瑞霞. 小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层制备[J]. 标记免疫分析与临床, 2013, 20(1): 46-48 |
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| 作者姓名： | 叶珏 张燕婉 时娜 杨子鹤 宋莉 孟宪敏 徐瑞霞 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037;中国医学科学院阜外心血管病医院中心实验室,北京,100037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，高校博士点基金新教师类项目 |
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| 摘 要： | 目的建立小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层,用于胚胎干细胞的培养。方法取孕13～15d的昆明种小鼠,分离原代成纤维细胞,在37℃时,用0.25%胰蛋白酶(含0.04%EDTA)消化组织块5min,重复消化多次,24h首次换液,培养3d后传代。采用10μg/mL丝裂霉素C处理胚胎成纤维细胞3h,制备出的饲养层细胞能有效地抑制胚胎干细胞的分裂,且不影响其活力。结果胎鼠分离原代成纤维细胞经10μg/mL丝裂霉素C处理后,细胞仍保持分泌多种生长因子的能力,在10d内既不增殖,也不死亡,能够很好的维持胚胎干细胞克隆的生长。结论该方法制备的饲养细胞层适用于胚胎干细胞的培养。
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| 关 键 词： | 小鼠胚胎成纤维细胞 丝裂霉素C 饲养层 胚胎干细胞 |
Preparation of Feeder Layer and Mouse Embryonic Fibroblast Cells in Primary Culture |
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| YE Jue , ZHANG Yan-wan , SHI Na , YANG Zi-he , SONG Li , MENG Xian-min , XU Rui-xia. Preparation of Feeder Layer and Mouse Embryonic Fibroblast Cells in Primary Culture[J]. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine, 2013, 20(1): 46-48 |
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| Authors: | YE Jue ZHANG Yan-wan SHI Na YANG Zi-he SONG Li MENG Xian-min XU Rui-xia |
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| Affiliation: | (Central laboratory,Fu-Wai Hospital,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100037,China) |
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