-70℃超低温冻存细胞的实验研究

目的]探索-70℃超低温条件冻存细胞的可行方法。方法]用-70℃超低温冰箱冻存对数生长期的C6／36、BHK-21、Vero和MDCK细胞，冻存30、60和90d后，37℃水浴复苏，用MTT法测定细胞活性，计算冷冻存活率；同时观察复苏细胞形态，并与液氮冻存方法同步比较。结果]-70℃冻存后复苏细胞均可获得90％以上的存活率，与液氮冻存细胞的复苏效果类似。光镜下显示，冻存细胞均可在拟定的冻存期内成功复苏。复苏即时镜下90％以上的细胞呈现良好的活细胞形态悬浮在培养基中。结论]-70℃超低温冰箱冻存细胞的方法可行，尤其适用于基层或液氮来源困难地区开展细胞培养研究。