多瘤病毒MT基因真核表达载体的构建

目的：构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法：从野生型多瘤病毒上取其nt4632至nt1560片段克隆到pUC19上,再将该片段定点插入pEGFP1的HindⅢ和CcoR Ⅰ位点间,构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体pPyMT-GFP。经线性化,将重组体导入鼠皮肤成纤维细胞中,G418选择培养,得到抗性细胞克隆。结果：构建的pPyMT-GFP质粒在鼠成纤维细胞中有稳定表达,结论：来源于野生型多瘤病毒的PyMT基因在哺乳动物细胞中有稳定表达,其真核表达载体pPyMT-GFP可被进一步用于研究PyMT蛋白在血管瘤发生中的作用。