| 摘 要： | 目的探讨Dicer抑制对卵巢癌细胞A2780增殖和迁移能力的影响,以进一步明确Dicer在卵巢癌生物学行为中的作用。方法合成Dicer的小干扰RNA(Dicer siRNA)转染A2780细胞并筛选有效siRNA,实时定量PCR(RT-PCR)检测Dicer的mRNA的表达,蛋白印迹法检测Dicer蛋白的表达,MTT检测细胞生长活力,Transwell小室检测细胞迁移能力,流式细胞仪测定细胞周期。结果与未转染组相比,siRNA1658转染组Dicer基因mRNA的表达最低,为(0.194±0.002),明显低于siRNA1897转染组的(0.535±0.015),差异有统计学意义(P0.001),但与siRNA334组的(0.251±0.014)相比,差异无统计学意义(P0.05)。实时定量PCR结果显示,以未转染A2780细胞Dicer mRNA表达水平为100%,si Dicer-A2780细胞Dicer的mRNA水平相对下降(0.157±0.012),差异有统计学意义(P0.001)。以未转染A2780细胞Dicer的蛋白表达水平为100%,si Dicer-A2780细胞Dicer的蛋白水平相对下降(0.153±0.021),差异有统计学意义(P0.001)。在种板后第3天、第4天、第5天,与对照组细胞比较,si Dicer转染的A2780细胞增殖能力增强(P均0.05)。与对照组转染si NC的细胞相比,转染si Dicer 96 h后,si Dicer-A2780细胞的增殖活性平均上升了23%。细胞周期分析结果显示si Dicer-A2780细胞中G0/G1期占(44.26±0.48)%,S期占(25.05±1.20)%,G2/M期占(21.53±0.77)%;对照组si NC-A2780细胞中G0/G1期占(52.79±1.11)%,S期占(20.01±1.22)%,G2/M期占(19.80±0.24)%。si Dicer-A2780细胞S期和G2/M细胞较对照组明显增加(P均0.05),而G0/G1期细胞则减少(P0.001)。与对照组si NC-A2780细胞的穿膜细胞数相比,抑制Dicer表达的si Dicer-A2780细胞的穿膜细胞数增加(3.99±0.29)倍(P0.001)。结论 Dicer基因具有抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭的能力。
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