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小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子保护多巴胺能神经元的实验
引用本文:范东艳,王苹,刘然,牛凤兰,杜波.小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子保护多巴胺能神经元的实验[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(6).
作者姓名:范东艳  王苹  刘然  牛凤兰  杜波
作者单位:1. 吉林大学公共卫生学院毒理学教研室,吉林省长春市,130021
2. 吉林大学第一临床医院耳鼻喉-头颈外科,吉林省长春市,130021
3. 吉林大学公共卫生学院毒理学教研室,吉林省长春市,130021;长春市中心血站,吉林省长春市,130000
摘    要:背景:目前尚未见骨髓间充质干细胞对活化的小胶质细胞特异性反应的报道,且有关骨髓间充质干细胞在特定微环境下如何维持多巴胺能神经元的存活也缺乏相应的实验证据.目的:观察骨髓间充质干细胞在活化的小胶质细胞刺激下保护多巴胺能神经元存活的作用.方法:取Wistar大鼠,贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,体外培养并活化小胶质细胞,酶消化法培养中脑多巴胺能神经元.实验分为5组:骨髓间充质干细胞组;小胶质细胞组;脂多糖+小胶质细胞组;骨髓间充质干细胞+脂多糖+小胶质细胞组;分别取各实验组的培养上清,对中脑多巴胺神经元进行培养.单纯多巴胺能神经元组采用体积分数为10%胎牛血清+DMEM/F12进行培养.采用免疫荧光技术检测不同微环境对多巴胺能神经元存活的影响及不同微环境对骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子的影响.结果与结论:含有骨髓间充质干细胞的实验组胶质细胞源性神经营养因子的释放量均较相应的对照组高.酪氨酸羟化酶免疫荧光染色结果发现,单纯多巴胺能神经元组神经元的存活率为15%;小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率为10%;骨髓间充质干细胞组多巴胺能神经元的存活率为35%;脂多糖+小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率为5%;而骨髓间充质干细胞+脂多糖+小胶质细胞组多巴胺能神经元的存活率达到了28%,高于除骨髓间充质干细胞组外的其他各组(P < 0.05).此外体外培养多巴胺能神经元存活率随培养时间延长下降,但含有骨髓间充质干细胞实验组的多巴胺能神经元存活率明显高于相应对照组.提示小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞上调胶质细胞源性神经营养因子表达,使得多巴胺能神经元免受毒素的损害,抑制了多巴胺能神经元的延迟性死亡.

关 键 词:多巴胺能神经元  骨髓间充质干细胞  胶质细胞源性神经营养因子  小胶质细胞  帕金森病

Microglia activation stimulates bone marrow mesenchymal stem cells to release gliocyte-derived neurotrophic factor for protection of dopaminergic neurons
Fan Dong-yan,Wang Ping,Liu Ran,Niu Feng-lan,Du Bo.Microglia activation stimulates bone marrow mesenchymal stem cells to release gliocyte-derived neurotrophic factor for protection of dopaminergic neurons[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(6).
Authors:Fan Dong-yan  Wang Ping  Liu Ran  Niu Feng-lan  Du Bo
Institution:Fan Dong-yan1,Wang Ping2,Liu Ran1,3,Niu Feng-lan1,Du Bo2 1Teaching , Research Section of Toxicology,College of Public Health,Jilin University,Changchun 130021,Jilin Province,China,2Department of Otolaryngology,Head , Neck Surgery,First Clinical Hospital,3Changchun Blood Center,Changchun 130000
Abstract:BACKGROUND:Studies are very few regarding the specific reaction of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) to activated microglia.Moreover,it remains unclear how MSCs maintain dopaminergic neuronal survival under specific microenvironment.OBJECTIVE:To explore the effect of BMSCs stimulated by activated microglia on dopaminergic neuron survival.METHODS:BMSCs were isolated from Wistar rats by attachment method,and in vitro cultured;microglia was activated,and dopaminergic neurons were cultured by enzyme di...
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