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DNA干扰对低氧诱导的心脏成纤维细胞结缔组织生长因子的表达和胶原合成的影响
引用本文:孙家扬,刘春涛,黄妮雯. DNA干扰对低氧诱导的心脏成纤维细胞结缔组织生长因子的表达和胶原合成的影响[J]. 四川大学学报(医学版), 2011, 42(2)
作者姓名:孙家扬  刘春涛  黄妮雯
作者单位:1. 四川大学华西医院临床药理研究所,成都,610041
2. 四川大学华西医院临床药理研究所,成都,610041;四川大学华西医院,呼吸内科,成都,610041
3. 四川大学华西医院,呼吸内科,成都,610041
摘    要:目的 研究慢病毒载体pGCL-GFP介导的结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(CTGF-ShRNA)干扰质粒对低氧诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFs)CTGF表达、细胞增殖和胶原合成的影响.方法 构建并筛选CTGF-ShRNA干扰质粒,PCR鉴定阳性克隆,重组质粒转染后随机分为4组,正常(Control)组,低氧(Hypoxia)组,低氧+慢病毒空载体(Hypo+pGCL-GFP)组和低氧+CTGF-ShRNA(Hypo+CTGF-ShRNA)组,实时荧光定量PCR及Western blot分析4组CFs CTGF mRNA及蛋白的相对表达水平,WST-1试剂盒和羟脯氨酸检测试剂盒分别检测4组细胞增殖情况和培养基中的胶原含量.结果 成功构建并筛选CTGF-shRNA.与Control组比较,Hypoxia组、Hypo+pGCL-GFP组、Hypo+CTGF-ShRNA组CTGF mRNA相对表达水平升高(P<0.05),CTGF蛋白相对表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活跃(P<0.05),胶原合成升高(P<0.05).与Hypoxia组和Hypo+pGCL-GFP组比较,Hypo+CTGF-ShRNA组低氧诱导的CFs CTGF mRNA表达被抑制(P<0.01),CTGF蛋白合成降低(P<0.01),细胞增殖被抑制(P<0.01),胶原合成减少(P<0.01).结论 CTGF-ShRNA抑制低氧诱导的CFs CTGF mRNA表达和蛋白合成,抑制低氧诱导的CFs细胞增殖和胶原合成.

关 键 词:RNA干扰  心脏成纤维细胞  低氧  结缔组织生长因子  胶原

Effect of RNA Interference on CTGF Expression and Collagen Synthesis Induced by Hypoxia in Rat Cardiac Fibroblasts
SUN Jia-yang,LIU Chun-tao,HUANG Ni-wen. Effect of RNA Interference on CTGF Expression and Collagen Synthesis Induced by Hypoxia in Rat Cardiac Fibroblasts[J]. Journal of Sichuan University. Medical science edition, 2011, 42(2)
Authors:SUN Jia-yang  LIU Chun-tao  HUANG Ni-wen
Abstract:
Keywords:
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