硫代磷酸化反义寡核苷酸对耐放疗舌癌细胞MDR1基因和P-gp表达的抑制作用

目的：研究反义硫代磷酸化寡核苷酸（phosphorothioate antisense oligonuc leotide，PS—ASOs）抑制人舌癌细胞耐放疗株Tca 8113多药耐药基因1（multidrug resistance gene 1，MDR1）以及MDR1蛋白（P-gp）表达的作用。方法：人工合成互补于MDR1基因mRNA特定片断的硫代磷酸化正反义寡核苷酸；PS—ASOs浓度分别为0．1μmol／L，0．25μmol／L，0．5μmol／L，以正义寡核苷酸作为实验对照，未转染的耐放疗组为空白对照，以5μl／ml脂质体Lipofectamine为载体转染耐放疗的Tca8113细胞株；逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）测定转染后MDR1 mRNA表达，流式细胞技术（FCM）测定细胞膜P—gp表达。结果：与正义组和空白对照组相比，转染PS—ASOs后12h，MDRI mRNA和P—gP表达降低，转染24h，各剂量组表达均降至最低，在转染48h后，基本恢复到转染前水平，而正义组和空白对照组在各时段及各剂量组均无统计学差异；双因素方差分析：PS—ASOs不同浓度（P=0．00）、不同作用时间仳0．00）对下调MDRI mRNA、P—gp表达差异显著，结论：PS—ASOs能降低MDR1基因以及蛋白的表达；PS—ASOs的作用具有浓度依赖性和时间依赖性。

Suppression of expression of multidrug resistance gene 1 in human tongue carcinoma cell radio-resistance line by phosphorothioate antisense oligonu cleotides