| 建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株 |
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| 引用本文： | 夏焱,苏浩彬,马国川,陈纯,郭海霞,方建培,黄绍良.建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株[J].中山医科大学学报,2005,26(5):528-532. |
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| 作者姓名： | 夏焱 苏浩彬 马国川 陈纯 郭海霞 方建培 黄绍良 |
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| 作者单位： | [1]中山大学附属第二医院儿科,广东广州510120 [2]广东省体育运动技术学院体育医院,广东广州510100 |
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| 基金项目： | 广东省卫生厅科研基金资助项目（E00d003012） |
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| 摘 要： | 【目的】为探索XIAP相关因子1（Xaf1）调节肿瘤细胞凋亡的机制，利用基因开关调节系统（Tet-on），拟建立由doxycycline调控表达的Xaf1诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1和pWZL-Hyg质粒用基因转染技术转入稳定表达nTA的Saos-2细胞中。经过hygromycin的抗性筛选，挑出并扩增表达Xaf1的细胞株。在8例实验组中加入doxycycline，和不加doxycycline的8例对照组比较，重复3次实验用免疫印迹法和免疫荧光显微镜检测doxycycline对Xaf1表达的调控。Xaf1诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示。【结果】在30个抗hygromycin的细胞株中，免疫印迹法筛选出5个明显由doxycychne调控诱导表达Xaf1的细胞株，免疫荧光显微镜检测显示doxycycline诱导Xaf1表达于细胞核内。流式细胞检测Xaf1于8h开始诱导Saos细胞凋亡，凋亡率最高约20％，而且不影响细胞周期。【结论】Xaf1-Saos诱导细胞株是研究Xaf1调节肿瘤细胞凋亡机制的良好细胞模型；Xaf1是一种核蛋白，能独立诱导肿瘤细胞凋亡。
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| 关 键 词： | Tet-on系统 XIAP相关因子1（Xaf1） 凋亡 肿瘤 诱导细胞株 |
| 文章编号： | 1672-3554（2005）05-0528-5 |
| 收稿时间： | 2005-03-15 |
Establishment of a Cell Line Expressing Xafl Induced by Doxycycline |
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| Xia Yan;Su HaoBin;Ma GuoChuan;Chen Chun;Guo HaiXia;Fang JianPei;Huang ShaoLiang.Establishment of a Cell Line Expressing Xafl Induced by Doxycycline[J].Academic Journal of Sun Yat-sen University of Medical Sciences,2005,26(5):528-532. |
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| Authors: | Xia Yan;Su HaoBin;Ma GuoChuan;Chen Chun;Guo HaiXia;Fang JianPei;Huang ShaoLiang |
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